骨髓间充质干细胞联合丹红注射液干预脑梗死组织GAP-43、Bcl-2的表达

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.32.019

中国组织工程研究 ›› 2013, Vol. 17 ›› Issue (32): 5871-5876.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.32.019

• 干细胞与中医药 stem cells and traditional Chinese medicine • 上一篇下一篇

骨髓间充质干细胞联合丹红注射液干预脑梗死组织GAP-43、Bcl-2的表达

李金艳^1，2，张哲成^1，3

1天津医科大学研究生院，天津市 300070
2天津市第五中心医院神经内科，天津市 300070
3天津市第三中心医院神经内科，天津市 300070

收稿日期:2013-04-05 修回日期:2013-07-03 出版日期:2013-08-06 发布日期:2013-08-06
通讯作者: 张哲成，教授，硕士生导师，天津市第三中心医院神经内科，天津市 300070 zzc0912@163.com
作者简介:李金艳★，女，1975年生，天津市人，汉族，天津医科大学在读硕士，主要从事神经内科脑血管病方面的研究。 1599617232@qq.com

Effect of bone marrow mesenchymal stem cells combined with Danhong injection on expression of GAP-43 and Bcl-2 after cerebral infarction

Li Jin-yan^{1, 2}, Zhang Zhe-cheng^{1, 3}

1Graduate School, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China
2Department of Neurology, Tianjin Fifth Central Hospital, Tianjin 300070, China
3Department of Neurology, Tianjin Third Central Hospital, Tianjin 300070, China

Received:2013-04-05 Revised:2013-07-03 Online:2013-08-06 Published:2013-08-06
Contact: Zhang Zhe-cheng, Professor, Master’s supervisor, Department of Neurology, Tianjin Third Central Hospital, Tianjin 300070, China zzc0912@163.com
About author:Li Jin-yan★, Studying for master’s degree, Graduate School, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China; Department of Neurology, Tianjin Fifth Central Hospital, Tianjin 300070, China 1599617232@qq.com

摘要/Abstract

摘要：

背景：丹红注射液能够清除自由基和抑制脂质过氧化反应，能够改善中枢神经系统梗死后损伤区的微环境。
目的：探讨骨髓间充质干细胞移植联合丹红注射液对大鼠脑梗死组织GAP-43、Bcl-2表达的影响。
方法：选取Wistar大鼠60只，建立大脑中动脉闭塞模型，随机分为对照组、骨髓间充质干细胞组和联合治疗组。对照组尾静脉注射PBS、骨髓间充质干细胞组尾静脉注射2.5×10⁹ L^-1的骨髓间充质干细胞悬液、联合治疗组联合注射2 mL/kg丹红注射液+2.5×10⁹ L^-1的骨髓间充质干细胞悬液，均连续5 d，1次/d。
结果与结论：移植后24 h，3 d各组间大鼠神经功能障碍评分差异无显著性意义(P > 0.05)，移植后1周、2周，联合治疗组大鼠神经功能障碍评分低于骨髓间充质干细胞组及对照组(P < 0.05)；在联合治疗组中，GAP-43、Bcl-2的表达明显高于骨髓间充质干细胞组及对照组(P < 0.05)。说明骨髓间充质干细胞移植与丹红注射液联合应用可明显促进脑梗死局部GAP-43、Bcl-2的表达，对大鼠脑梗死细胞凋亡具有明显抑制作用。

关键词: 干细胞, 干细胞与中医药, 骨髓间充质干细胞, 脑梗死, 丹红注射液, GAP-43, Bcl-2

Abstract:

BACKGROUND: Danhong injection, scavenging free radicals and inhibiting lipid peroxidation, can improve microenvironment injury after cerebral infarction.
OBJECTIVE: To explore the influence of bone marrow mesenchymal stem cells combined with Danhong injection on expression of GAP-43 and Bcl-2 after cerebral infarction in rats.
METHODS: Sixty Wistar rats were selected to prepare models of cerebral infarction by middle cerebral artery occlusion and then randomly divided into control group, bone marrow mesenchymal stem cell group, and combination group. Control group received tail vein injection of PBS. Bone marrow mesenchymal stem cell group received tail vein injection of 2.5×10⁹/L bone marrow mesenchymal stem cell suspension. Combination group received injection of 2.5× 10⁹/L bone marrow mesenchymal stem cell suspension+2 mL/kg Danhong injection, for 5 consecutive days, once a day.
RESULTS AND CONCLUSION: There were no significant differences in the neurological dysfunction scores among the three groups at 24 hour and 3 days after implantation (P > 0.05). The neurological dysfunction scores in the ombination group were significantly lower than those in the bone marrow mesenchymal stem cell group and control group at 1 and 2 weeks after transplantation (P < 0.05). In the combination group, GAP-43 and Bcl-2 expression was significantly higher than the bone marrow mesenchymal stem cell group and control group (P < 0.05). Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation combined with Danhong injection can significantly promote the local expression of GAP-43 and Bcl-2 after cerebral infarction, and has obvious inhibitory effects on cell apoptosis in rats with cerebral infarction.

Key words: stem cells, stem cells and traditional Chinese medicine, bone marrow mesenchymal stem cells, cerebral infarction, Danhong injection, GAP-43, Bcl-2

中图分类号:

R394.2

李金艳，张哲成. 骨髓间充质干细胞联合丹红注射液干预脑梗死组织GAP-43、Bcl-2的表达[J]. 中国组织工程研究, 2013, 17(32): 5871-5876.

Li Jin-yan, Zhang Zhe-cheng. Effect of bone marrow mesenchymal stem cells combined with Danhong injection on expression of GAP-43 and Bcl-2 after cerebral infarction [J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2013, 17(32): 5871-5876.

图/表（结果） 6

2.1 骨髓间充质干细胞的形态观察 接种5 d后，首次换液可见：细胞贴壁，骨髓间充质干细胞散在分布于培养瓶底，呈菱形或三角形，胞体透亮，折光性好，细胞体变得细长，并有小丛形成。5-8 d 后贴壁集落数目明显增多，随着细胞的不断扩增，细胞形态渐趋于一致，贴壁细胞分布均匀，以梭形为主，胞体饱满。第14-15天细胞集落逐渐与邻近集落融合成片，见图1。流式细胞仪检测结果显示骨髓间充质干细胞均一性好，纯度达97%以上^[7]。

2.2 RT-PCR检测结果 伤后2周脑梗死周围组织GAP-43、Bcl-2 mRNA的表达联合治疗组高于骨髓间充质干细胞组和对照组(P < 0.05)，见图2，表2。

2.3 大鼠神经功能评分 各组大鼠神经功能评分比较，在移植后第3天，联合治疗组与骨髓间充质干细胞组、对照组比较差异无显著性意义(P > 0.05)；在移植后1周开始，联合治疗组与对照组比较，差异有显著性意义(P < 0.01)，与骨髓间充质干细胞组比较，差异有显著性意义(P < 0.05)，骨髓间充质干细胞组与对照组比较，差异有显著性意义(P < 0.05)，见表3。

2.4 TUNEL检测细胞凋亡 细胞核内存在棕黄色颗粒者为凋亡细胞。光镜下(×400)细胞散布于整个缺血区内，病灶边缘可见成堆的阳性细胞，有染色质边集及核固缩现象，个别区域可见凋亡小体。TUNEL法测定，联合治疗组中，免疫组化呈棕黄色颗粒的凋亡细胞明显少于骨髓间充质干细胞组及对照组(P < 0.05)，见图3-5。

2.5 Brdu免疫组化结果 治疗后2周显微镜光镜下(×400)观察结果显示大鼠脑梗死组织中的Brdu阳性细胞数：对照组未见Brdu阳性细胞，见图6；骨髓间充质干细胞组为(23.24±4.24)个/高倍视野，见图7；联合治疗组为(42.32±7.46)个/高倍视野，见图8，各组之间差异有显著性意义(P < 0.01)。

参考文献

[1] Li J, Zhu H, Liu Y, et al. Human mesenchymal stem cell transplantation protects against cerebral ischemic injury and upregulates interleukin-10 expression in Macacafascicularis. Brain Res. 2010;1334:65-72.

[2] 张洪连,吴晓牧. 骨髓间充质干细胞移植治疗脑梗死及存在问题[J].中华脑血管病杂志,2010,4(4):300-307.

[3] 张婷勇.骨髓间充质干细胞移植并用单唾液酸神经节苷脂治疗大鼠脑梗死[J]. 中国组织工程研究与临床康复,2011,15(14): 2557-2561.

[4] 朱路文,刘宏光,张春艳.任务导向性训练对局灶性脑梗死大鼠前肢运动功能及缺血区突触素和生长相关蛋白-43表达的影响[J].中国康复理论与实践,2012,18(4):319-323.

[5] 刘志婷,俞天虹,曲铁兵,等.补阳还五汤对小鼠局灶性脑缺血后生长相关蛋白43和突触素表达的影响[J].中华行为医学与脑科学杂志,2012,21(12):1070-1072.

[6] 龚誉华,程光宇,程为平.中药补脑止痫散对癫痫大鼠海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响[J].环球中医药,2012,5(2): 105-107.

[7] Jiang W, Xia F, Han J, et al. Patterns of Nogo-A, NgR, and RhoA expression in the brain tissues of rats with focal cerebral infarction. Transl Res. 2009;154(1):40-48.

[8] Kim SS, Yoo SW, Park TS, et al. Neural induction with neurogenin1 increases the therapeutic effects of mesenchymal stem cells in the ischemic brain. Stem Cells. 2008;26(9):2217-2228.

[9] Theus MH, Wei L, Cui L, et al. In vitro hypoxic preconditioning of embryonic stem cells as a strategy of promoting cell survival and functional benefits after transplantation into the ischemic rat brain. Exp Neurol. 2008;210(2):656-670.

[10] Shen LH, Li Y, Gao Q, et al. wn-regulation of neurocan expression in reactive astrocytes promotes axonal regeneration and facilitates the neurorestorative effects of bone marrow stromal cells in the ischemic rat brain. Glia. 2008;56(16):1747-1754.

[11] Kim SS, Yoo SW, Park TS, et al. Neural induction with neurogenin1 increases the therapeutic effects of mesenchymal stem cells in the ischemic brain. Stem Cells. 2008;26(9):2217-2228.

[12] Li Y, Chen J, Chen XG, et al. Human marrow stromal cell therapyfor troke in rat: Neurotrophins and functional recovery. Neurology. 2002;59(4):514-523.

[13] Zhang J, Li Y, Zhang ZG, et al. Bone marrow stromal cells increase oligodendrogenesis after stroke. J Cereb Blood Flow Metab. 2009;29(6):1166-1174.

[14] 杨锁成,汪坤,张振凌.HPLC同时测定复方丹参降浊丸中丹参酮ⅡA和丹酚酸B[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(9):84-86.

[15] 韩丽妹,付艳,张丽红,等.新型药用辅料对复方丹参片药剂学性质及溶出性能的影响[J].复旦学报:医学版,2011,38(3):233-236.

[16] Freret T, Bouet V, Leconte C,et al. Behavioral deficits after distal focal cerebral ischemia in mice: Usefulness of adhesive removal test. Behav Neurosci. 2009;123(1):224-230.

[17] 王溯.丹红治疗对急性脑梗死大鼠运动功能改善的影响论著[J]. 临床和实验医学杂志, 2010,9(16):1204-1205.

[18] 张春燕.红花注射液对急性脑梗死病人疗效、血脂、血液流变学的影响[J].中国新药与临床杂志,2001,20(4):273-275.

[19] 舒榕,刘冬玲,王强.瑞芬太尼对大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质bcl-2和Caspase-3表达的影响[J].华中科技大学学报:医学版, 2012,41(1):72-75.

[20] 陈文杰,胡伟鑫.依达拉奉对颅脑损伤大鼠脑组织Bcl-2和Bax表达的影响[J].北方药学,2012,9(5):44-45.

[21] 杨金龙,程朝辉,刘双,等.2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉对大鼠脑缺血再灌注损伤后Bcl-2和Bax表达的影响[J].温州医学院学报, 2012, 42(2):129-131.

[22] 董银凤,陈前芬.大豆异黄酮对大鼠脑缺血再灌后ATP酶及bcl-2和bax的影响[J].蚌埠医学院学报,2012,37(1):8-11.

[23] 马晓丽,张丽华,张士岭,等.EP对HIBD新生大鼠脑组织BCL-2及BAX表达的影响[J].中国伤残医学,2012,20(1):24-25.

[24] 张博,胡婷婷,张萍,等.EPO对大鼠急性脊髓损伤后Bcl-2及Bax表达与运动神经元凋亡的影响[J].辽宁中医药大学学报,2012, (10): 122-123.

[25] 张迪,裴少保,王海峰,等.海水浸泡对兔脊髓损伤Bcl-2和Bax基因表达的影响[J].中华全科医学,2012(2):168-169,333.

[26] 宋月平,苏立凯,钟娅莉,等.替勃龙对大鼠神经细胞Bcl-2、Bax表达的影响[J].河北医药,2012,34(1):14-16.

[27] 税林,王霞,金茂强.大鼠脑干损伤GAP-43、NOS3、HIF-1α的表达及其表达时相的相关性研究[J].新疆医科大学学报,2012, 35(4): 457-461,466.

[28] 王瑞红,侯世科,吴志鸿.GAP-43与受损后视网膜神经节细胞存活和再生关系的研究进展[J].国际眼科纵览,2012,36(3): 172-177.

[29] 张玉辉,郝飞,朴花,等.ATP诱导大鼠原代培养海马神经元神经毒性及对GAP-43表达的影响[J].神经解剖学杂志,2011,27(5): 527-533.

[30] 郑里翔,汪敏,乔玉丹,等.补骨脂汤对痴呆大鼠海马神经元保护及GAP-43基因表达的影响[J].时珍国医国药,2011,22(10): 2382-2384.

引言

材料方法

设计：随机对照动物实验。

时间及地点：实验于2011年7月至2012年7月在天津市第三中心医院完成。

材料：

实验动物：健康清洁级Wistar大鼠60只，雌雄各半，体质量210-270 g；1月龄SD大鼠，雌雄不限，均购自中国医学科学院动物实验室，动物质量合格证号：SCXK20060008。实验中对动物的处置方法符合动物伦理学相关要求。

骨髓间充质干细胞与丹红注射液联合干预大鼠脑梗死组织实验主要试剂及仪器：

实验方法：

骨髓间充质干细胞的培养和标记：取1月龄SD大鼠(雌雄不限)处死，全身浸入体积分数75%乙醇中消毒，约10 min。无菌条件下取出双侧胫骨、股骨，剪除骨端后，10号注射器抽取1 mL DMEM完全培养基自一端冲洗，制成单细胞悬液，按3×10⁷ L^-1细胞浓度接种于100 mL培养瓶中，置37 ℃、体积分数5%CO₂及饱和湿度孵育箱中，24 h后换液,以后每3 d换液1次。并按1∶2比例进行传代。经多次传代扩增培养后，使骨髓间充质干细胞逐渐得到纯化和扩增。通过流式细胞仪检测大鼠骨髓间充质干细胞表面抗原进行鉴定后。取经鉴定的骨髓间充质干细胞，以0.25%胰蛋白酶消化制成单细胞悬液，无血清DMEM/F12培养基洗涤细胞1次，锥虫蓝1∶10稀释后计数细胞，观察细胞的生存率。荧光显微镜观察标记培养24 h后的细胞特征。

体外BrdU标记：BrdU在细胞有丝分裂S期掺入细胞核中来标记细胞，移植时PBS洗涤细胞3次，将终浓度调为2.5×10⁹ L^-¹备用。

动物模型的建立和分组：采取线栓法制作大脑中动脉阻塞模型：大鼠用2.5%氯胺酮20 mg/kg腹腔注射麻醉，俯卧位，取颈正中切口，分离右侧颈总、颈内和颈外动脉，结扎颈总动脉、颈外动脉，于颈总动脉分叉下方剪一切口，将明胶处理过的1.8号鱼线经切口插入右颈内动脉，进线深度为17.0-18.0 mm，结扎颈内动脉，以完全阻断血供。阻断120 min后抽出尼龙线，恢复再灌注。模型成功的标志是大鼠即刻出现右侧Horner征。

实验分组：将大脑中动脉阻塞成模SD大鼠60只随机分为对照组、骨髓间充质干细胞组和联合治疗组(骨髓间充质干细胞移植+丹红注射液)，每组20只；在大脑中动脉阻塞建模成功24 h后，对照组大鼠尾静脉注射1.0 mL无菌PBS；骨髓间充质干细胞组大鼠尾静脉注射1.0 mL骨髓间充质干细胞悬液(2.5×10⁹ L^-¹)；联合治疗组大鼠尾静脉注射1.0 mL骨髓间充质干细胞悬液(2.5×10⁹ L^-¹)+ 2 mL/kg丹红注射液，均为连续注射5 d，1次/d。

大鼠神经功能评分：各组分别在治疗后的1 d，3 d，1周，2周，应用改良神经功能评分法(modified neurological severity scores，mNSS)进行神经功能缺失评测。该量表分为运动、感觉、平衡和反射4个部分，总分为18分，以神经功能缺失评分在6-12分入选实验分组。正常大鼠为0分，评分越低代表神经运动功能恢复越好，评分越高，则表示症状越重。

RT-PCR检测：伤后2周取每组6只大鼠100 mg/只脑梗死区组织制备匀浆，用Trizol提取RNA，紫外分光光度仪测定RNA含量，通过MMLV 试剂盒中步骤将RNA 反转录成cDNA再将cDNA进行RT-PCR分析。按照Trizol说明书介绍的方法提取组织总RNA，以总RNA为模板、Oligo(dT)为引物，通过RT-PCR两步法试剂盒将mRNA反转录成cDNA，反应参数为：30 ℃，10 min→2 ℃，30 min→99 ℃，5 min→5 ℃，5 min。将cDNA -20 ℃保存。将反转录所得cDNA为模板，相关引物序列见，见表1。上游引物0.5 μL、下游引物0.5 μL，40 μL体系。扩增参数：94 ℃，2 min,→(94 ℃，30 s→55 ℃，30 s →72 ℃，30 s)×35循环→72 ℃，5 min。取PCR产物通过琼脂糖电泳后采用FR200图像分析系统分析。

TUNEL法染色：各组于2周后随机各取6只大鼠取脑梗死区组织，切片经石蜡包埋、脱蜡水化后，PBS漂洗5 min×3，于37 ℃的蛋白酶K处理切片。入通透液(0.3% Triton PBS配，含体积分数3%羊血清)4 ℃孵育20 min。将TUNEL Ⅰ和Ⅱ液按1∶9混合滴于铺片上，37 ℃恒温箱内孵育2 h。入荧光抗体37 ℃ 1 h，PBS漂洗5 min×3，滴入固红呈色液，显微镜下监视，约58 min停止反应。PBS漂洗5 min×3终止反应，甘油封片剂封固，光镜观察。

BrdU免疫组化染色：各组于2周后随机各取6只大鼠取脑梗死区组织用免疫组化法进行Brdu染色，在光观测大鼠脑内经Brdu标记的骨髓间充质干细胞在移植后的存活、迁移及分化情况。DAB显色，光学显微镜下观察，胞核着棕黄色的细胞判定为阳性。镜下观察，在每个盖玻片的中心和四周随机选择5个视野，进行细胞计数并镜下拍照记录，计算阳性细胞数的平均值。

主要观察指标：伤后1，2周行Longa行为学评分，检测神经功能的损伤情况。伤后2周将大鼠麻醉后断头取脑，RT-PCR检测脑组织中GAP-43、Bcl-2基因表达变化，用TUNEL法测定细胞凋亡情况、免疫组化法观察BrdU阳性细胞数。

统计学分析：SPSS 11.5统计软件包进行分析，所有实验数据均以x(_)±s表示，多组间比较用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，两组间比较用S-N-K-q检验，当P < 0.05时，为差异有显著性意义。

讨论

脑梗死发生后脑组织因缺血、缺氧而致神经功能损害，长期的神经功能损伤则可能导致脑神经功能的永久性缺陷^[8]。目前对脑梗所致缺血缺氧性脑损伤的研究有了新进展，干细胞移植是其研究热点之一^[9-10]。骨髓间充质干细胞是一种多潜能成体干细胞，具有多向分化潜能和自我更新的特点。大量骨髓间充质干细胞治疗脑梗死的实验表明骨髓间充质干细胞可分泌多种细胞因子，发挥抗凋亡、抗炎，促进脑损伤组织内源性修复等的作用^[11-12]，也可在脑组织中定植并自身分化为受损组织的细胞直接参与修复。但单纯骨髓间充质干细胞移植的修复作用仍不理想，还需与药物、理疗及生物工程材料等手段结合进行综合治疗^[13]。

丹红注射液是由中药丹参、红花科学提取精制而成的一种传统中药，有明显促进脑缺血后神经功能恢复、减少脑梗死体积的作用。有研究表明丹参性寒而味苦，具有的水溶性酚酸类成分和脂溶性丹参酮类成分，均是治疗脑血管病的有效药物^[14-15]。红花为菊科类植物，性温味辛，具有活血化瘀之功效^[16-18]。丹参酚酸和红花有抑制血小板黏附、聚集、激活的作用，以及能抗血栓形成、改善微循环等作用。脑梗死形成后，会出现局灶性脑缺血、脑水肿、脑细胞凋亡等，而氧自由基是其发生的主要因素。丹红注射液能有效地清除体内的活性氧分子，抑制梗死区迟发性神经元死亡^[17-18]，缩小梗死面积，抑制脂质过氧化及炎症递质的形成，减轻脑水肿，从而避免中枢神经系统的进一步损伤，有效保护脑细胞。本研究将丹红注射液和骨髓间充质干细胞移植联合应用治疗大鼠脑梗死，取得较好效果。结果显示二者联合应用可显著减少脑梗死区神经细胞凋亡，联合治疗组脑梗死区BrdU阳性细胞和神经元数量多于骨髓间充质干细胞组和对照组(P < 0.05)；在移植后2周，联合治疗组大鼠神经功能障碍评分低于骨髓间充质干细胞组和对照组(P < 0.05)；提示骨髓间充质干细胞移植联合丹红注射液治疗大鼠脑梗死能显著改善大鼠的神经学功能。

Bcl-2是具有抗凋亡特性的蛋白，参与调控神经细胞凋亡发生的过程，Bcl-2表达增加可起到抑制细胞凋亡的作用^[19-26]；GAP-43 mRNA的表达也较脑损伤区移植组低，GAP-43作为构建中枢神经系统可塑性的基本物质，是研究神经生长及损伤修复的首选分子标记物。实验结果显示在联合治疗组中，Bcl-2、GAP-43的表达明显高于骨髓间充质干细胞组及对照组(P < 0.05)。从分子生物学角度表明了联合治疗组较骨髓间充质干细胞组及对照组修复效果好，抗凋亡作用强。总之，用骨髓间充质干细胞联合丹红注射液治疗大鼠脑梗死，能使移植的骨髓间充质干细胞在损伤部位更好的存活^[27-30]。可进一步促进损伤局部GAP-43 mRNA的高表达，促进脑梗死后大鼠神经功能的恢复。同时使脑梗死周围组织Bcl-2表达增强，从而抑制神经细胞的凋亡，这可以为临床治疗脑梗死提供新的理论依据。

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骨髓间充质干细胞联合丹红注射液干预脑梗死组织GAP-43、Bcl-2的表达

Effect of bone marrow mesenchymal stem cells combined with Danhong injection on expression of GAP-43 and Bcl-2 after cerebral infarction

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[1]	蒲锐, 陈子扬, 袁凌燕. 不同细胞来源外泌体保护心脏的特点与效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(在线): 1-.
[2]	张秀梅, 翟运开, 赵杰, 赵萌. 类器官模型国内外数据库近10年文献研究热点分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1249-1255.
[3]	王正东, 黄娜, 陈婧娴, 郑作兵, 胡鑫宇, 李梅, 苏晓, 苏学森, 颜南. 丁酸钠抑制氟中毒可诱导小胶质细胞活化及炎症因子表达增多[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1075-1080.
[4]	汪显耀, 关亚琳, 刘忠山. 提高间充质干细胞治疗难愈性创面的策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1081-1087.
[5]	万然, 史旭, 刘京松, 王岩松. 间充质干细胞分泌组治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1088-1095.
[6]	廖成成, 安家兴, 谭张雪, 王倩, 刘建国. 口腔鳞状细胞癌干细胞的治疗靶点及应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1096-1103.
[7]	谢文佳, 夏天娇, 周卿云, 刘羽佳, 顾小萍. 小胶质细胞介导神经元损伤在神经退行性疾病中的作用[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1109-1115.
[8]	李珊珊, 郭笑霄, 尤冉, 杨秀芬, 赵露, 陈曦, 王艳玲. 感光细胞替代治疗视网膜变性疾病[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1116-1121.
[9]	焦慧, 张一宁, 宋雨晴, 林宇, 王秀丽. 乳腺癌类器官研究进展及临床应用前景[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1122-1128.
[10]	王诗琦, 张金生. 中医药调控缺血缺氧微环境对骨髓间充质干细胞增殖、分化及衰老的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1129-1134.
[11]	曾燕华, 郝延磊. 许旺细胞体外培养及纯化的系统性综述[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1135-1141.
[12]	孔德胜, 何晶晶, 冯宝峰, 郭瑞云, Asiamah Ernest Amponsah, 吕飞, 张舒涵, 张晓琳, 马隽, 崔慧先. 间充质干细胞修复大动物模型脊髓损伤疗效评价的Meta分析[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 1142-1148.
[13]	侯婧瑛, 于萌蕾, 郭天柱, 龙会宝, 吴浩. 缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 985-990.
[14]	史洋洋, 秦英飞, 吴福玲, 何潇, 张雪静. 胎盘间充质干细胞预处理预防小鼠毛细支气管炎[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 991-995.
[15]	梁学奇, 郭黎姣, 陈贺捷, 武杰, 孙雅琪, 邢稚坤, 邹海亮, 陈雪玲, 吴向未. 泡状棘球绦虫原头蚴抑制骨髓间充质干细胞向成纤维细胞的分化[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(7): 996-1001.